如何将磷酸化蛋白检测试剂盒的提取更为方便

发布日期： 2020-04-16

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　　磷酸化蛋白检测试剂盒的提取过程简单方便，可在1小时内完成。该试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。本试剂盒含有的*配方能够溶解细胞膜包括细胞质膜和核膜。磷酸化蛋白检测试剂盒的操作要求如下：

　　1．使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。

　　2．根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。

　　3．加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。

　　4．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

　　5．每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。

　　6．甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。

　　7．每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。

　　8．取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。

　　9．在450nm波长处测定各孔的OD值。

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